Berikut ini adalah satu prosedur pemeriksaan
laboratorium TPHA (Treponema palidum Hemaglutinasi)
Tujuan
: Untuk melihat ada
tidaknya antibodi terhadap treponema pada sampel.
Metode
: Hemaglutinasi tidak langsung
Prinsip
: Eritrosit burung
diawetkan yang dilapisi dengan komponen antigenik T. patogen pallidum (strain
Nichol s). mengaglutinasi Sel-sel ini dengan adanya antibodi spesifik untuk
menguji T. pallidum dan menunjukkan pola karakteristik dalam pelat
microtitration. Beberapa reaksi non-spesifik yang terjadi terdeteksi
menggunakan sel kontrol, eritrosit burung dilapisi dengan antigen T. pallidum
non. reaksi non-spesifik juga dapat diserap dengan menggunakan sel kontrol.
antibodi terhadap treponema non-patogen yang diserap oleh ekstrak treponema s
Reiter 'disertakan dalam hasil tes suspensi sel yang diperoleh dalam waktu
45-60 menit. dan pola aglutinasi sel mudah dibaca dan tahan lama.
Dasar
Teori : TPHA merupakan tes yang sangat
spesifik untuk melihat apakah adanya antibodi terhadap treponema. Jika di dalam
tubuh terdapat bakteri ini, maka hasil tes positif. Tes ini akan menjadi
negatif setelah 6 - 24 bulan setelah pengobatan. Bakteri-bakteri yang lain
selain keluarga treponema tidak dapat membuat hasil tes ini menjadi positif.
Reagen
:
- TPHA diluent
(tutup warna putih tabung kuning).
- Test cell (tutup
warna merah, sel darah merah unggas yang telah ditempeli ekstrak treponema
pallidum yang berfiungsi sebagai antigen).
- Control cell
(tutup warna putih, tabung warna hijau, berisi sel darah merah unggas),
tidak akan terjadi hemaglutinasi, karena tidak tejadi reaksi dengan Ab.
- Control positif
(tutup warna merah kecil).
- Control negatif(
tutup warna biru kecil).
Bahan
Pemeriksaan:
- Serum (tidak
menggunakan plasma).
- Sampel harus
bebas dari hemolisis dan kontamination.
- Serum dapat
disimpan pada suhu 2-8 °C jika ditambahkan pengawet sebelum penyimpanan.
Jika diperlukan waktu pemeriksaan yang lebih lama, serum harus dibekukan
di suhu -20 °C.
Cara
Kerja :
a.Kualitatif
/ Skrining
- Setiap tes
membutuhkan 4 lubang pada plate mikotitrasi. Masukkan 1 tetes (25
mikroliter) pengencer pada lubang 1. Masukkan 4 tetes (100 mikroltr)
pengencer pada lubang dan 1 tetes (25 mikroliter) untuk masing-masing
lubang 3 dan 4.
- Tambahkan 1 tts
(25 mikroliter) serum pada lubang 1 dengan mikropipet.
- Menggunakan
mikrodilutor campur isi lubang 1 dan pindahkan 25 mikroliter ke lubang 2.
Campur dan pindahkan 25 mikroliter ke lubang 3. Kocok kemudian buang.
Pindahkan 25 mikroliter dari lubang 2 ke lubang 4. Kocok.
- Pastikan bahwa
tes dan kontrol sel telah tercampur dengan benar. Tambahkan 3 tetes
(75mikroliter) kontrol sell ke lubang 3 dan 3 tts (75mkroltr)tes sel ke
lubang 4.
- Goyang plate
dengan benar untuk mencampur isi.
- Inkubasi 45-60
menit pada suhu ruang.
- Perhatian : jaga
plate dari panas, sinar matahari langsung dan berbagai getaran.
- Baca hasil
Interpretasi
Hasil :
- Hasil Negatif :
didefinisikan terdapat sel yang tidak teraglutinasi, dengan atau tanpa
lubang yang sangat kecil di tengah.
- Hasil Tidak
dapat ditentukan: dasar sel dengan sebuah rongga kecil di tengah (dengan
gambaran berupa cincin tebal, bagus dengan latar belakang bersih). Setiap
sampel harus di tes ulang.
- Hasil Positif:
sebagian atau total sel teraglutinasi, mungkin dikelilingi oleh lingkaran
dari sel. Sampel positif harus di tes ulang dengan tes kuantitatif
Title : Pemeriksaan Laboratorium TPHA (Treponema palidum Hemaglutinasi)
Description : Berikut ini adalah satu prosedur pemeriksaan laboratorium TPHA (Treponema palidum Hemaglutinasi) Tujuan : Untuk mel...